O envelhecimento da pele é um processo longo e complexo e representa a manifestação externa do envelhecimento.1 Cientistas desenvolveram o SCINEXA, um sistema de escore clínico para o envelhecimento da pele. Ele avalia o envelhecimento da pele com base em cinco índices: pigmentação irregular, rugas da pele, flacidez da pele, tecido adiposo reduzido e tumores cutâneos benignos.2 A ceratose seborreica (CS) é o tumor cutâneo benigno mais comum, e uma das lesões que indicam o envelhecimento cutâneo. Em geral, a CS também é conhecida como papiloma de células basais é um tumor intraepidérmico benigno, causado por atraso na maturação dos queratinócitos.3 A incidência de CS aumenta com a idade.4

Com o aumento da idade, as células imunes residentes na pele gradualmente envelhecem, um processo que enfraquece a capacidade de reparação do tecido cutâneo. Além disso, fatores externos como radiação ultravioleta, poluição do ar e fatores internos como diabetes mellitus e doenças vasculares aceleram ainda mais o envelhecimento dos tecidos cutâneos. Durante o ciclo de vida de um organismo, as proteínas são expostas a vários estresses metabólicos, causando mudança gradual nas propriedades estruturais e funcionais dos tecidos cutâneos. Esse fenômeno é desencadeado principalmente por modificações não enzimáticas pós‐translacionais de proteínas (nePTMs, non‐enzymatic post‐translational protein modifications), como reações de glicosilação e carbamilação.5 A reação de carbamilação é um processo no qual um cianato e seu isômero estrutural, ou seja, o isocianato, combinam‐se com grupos funcionais livres de proteínas, peptídeos ou aminoácidos livres.6 Na reação de carbamilação, diferentes grupos funcionais interagem e produzem diferentes derivados carbamilados; essa reação ocorre preferencialmente no grupo ɛ‐amino da lisina e forma N(6)‐carbamoil‐L‐lisina (CBL), comumente conhecida como homocitrulina (HCit)7 – o produto mais característico derivado da reação de carbamilação de proteínas. Estudos anteriores relataram que a reação de carbamilação de proteínas está envolvida em processos patológicos de doenças crônicas, como doença renal crônica, aterosclerose e artrite reumatoide.8–10 Por outro lado, poucos estudos investigaram o papel da reação de carbamilação de proteínas no processo de envelhecimento da pele. Gorisse et al.11 analisaram quantitativamente o conteúdo de HCit em extratos de pele total e isolaram proteínas de colágeno tipo I de pele humana, de bovinos e de camundongos. Eles descobriram que a concentração de HCit aumenta significantemente com o aumento da idade. Os autores realizaram uma avaliação com imunofluorescência da epiderme e derme obtidas de indivíduos de 20 a 80 anos de idade. Os resultados indicam que nos tecidos cutâneos de indivíduos de 80 anos, as proteínas de colágeno tipo I da epiderme e da derme exibem fluorescência mais forte, mostrando maior deposição de proteínas carbamiladas nesse grupo.

Carracedo et al.12 analisaram proteínas carbamiladas no sangue de indivíduos saudáveis. Eles descobriram que no grupo de indivíduos idosos (60 a 79 anos), o nível de proteína carbamilada era maior do que no grupo de indivíduos jovens (20 a 39 anos) e no grupo de indivíduos de meia‐idade (40 a 59 anos). Todos esses resultados indicam que existe correlação entre HCit, idade e senescência. A CS é tumor muito comum em dermatologia, e alguns estudos relataram que a CS ocorre por mutação do fator de crescimento de fibroblastos 3 (FGFR3).13,14 Christian Hafner et al. descobriram que 57% dos pacientes com CS tinham mutação no FGFR3; além disso, verificou‐se que a mutação do FGFR3 estava significantemente associada ao aumento da idade, e as frequências da mutação do FGFR3 eram significantemente maiores na região da cabeça e pescoço, porém menores no tronco e nos membros dos pacientes. Isso indica que a CS ocorre por exposição aos raios UV e envelhecimento local da pele. Além disso, a CS está mais correlacionada com a idade.4 A doença de Alzheimer é manifestação do envelhecimento em seres humanos. Kang M J et al. descobriram que as proteínas precursoras de amiloide (APP, amyloid precursor proteins) estão relacionadas com a doença de Alzheimer. Eles chegaram a um consenso de que a “placa senil” no cérebro é um marcador especial da doença de Alzheimer, e a mesma é formada em decorrência do acúmulo da proteína β‐amiloide (um produto de degradação), produzida por um processo proteolítico sequencial de clivagem de APP.15 Em estudo conduzido por Li Y et al., as APP foram maiores em pacientes com CS e aumentaram com a idade dos pacientes.16 Esses estudos mostram que a CS não é apenas uma manifestação do envelhecimento da pele, mas também está relacionada com o envelhecimento humano. Atualmente, o envelhecimento tem muitas manifestações e métodos de detecção, mas não apresenta nenhum indicador objetivo especial para avaliação laboratorial. A fim de fornecer evidências mais favoráveis e estabelecer a correlação entre HCit e envelhecimento da pele, os autores investigaram os diferentes níveis de expressão de HCit em pacientes com CS e na pele normal de controles saudáveis para determinar se a HCit pode refletir a diferença entre peles envelhecidas e não envelhecidas. Os autores também determinaram se houve variação do nível sérico de CBL entre indivíduos saudáveis e pacientes com CS, comparando ainda os níveis de expressão sérica de CBL entre indivíduos saudáveis e pacientes com CS de diferentes idades com base nos predecessores.

A expressão de HCit em pele saudável dos controles aumentaram com a idade pela análise imuno‐histoquímica.

Ao realizar a imuno‐histoquímica na pele de controles saudáveis, foi verificado que os núcleos dos queratinócitos apresentavam coloração marrom‐amarelada, e a intensidade da coloração aumentou com a idade dos indivíduos (fig. 1A). Além disso, o escore imuno‐histoquímico foi correlacionado com a idade dos indivíduos, com coeficiente de correlação de 0,806; p=0,0002 (fig. 1B).

Figura 1.

Expressões de homocitrulina na pele de controles saudáveis de diferentes idades. Dez campos microscópios de grande aumento (400×) foram selecionados aleatoriamente para observação em cada secção, e o escore foi computado de acordo com a intensidade da coloração e a porcentagem de células positivas na epiderme que foi pontuada de 0 a 4 pontos: <5%, 0 pontos; 5%‐25%, 1 ponto; 25%‐50%, 2 pontos; 50%‐75%, 3 pontos; ≥ 75%, 4 pontos. A intensidade da coloração foi pontuada de 0 a 3 pontos: sem coloração, 0; amarelo‐claro, 1; amarelo‐acastanhado, 2; castanho cor‐de‐chocolate, 3. Os pontos foram multiplicados para obter o escore final e, quanto maior o escore, mais forte era a expressão de HCit. Os dados medidos foram expressos como média±desvio padrão (χ±s). (A), Imagens representativas da análise imuno‐histoquímica de diferentes idades (A1: 32 anos; A2: 51 anos; A3: 81 anos). (B), Gráfico de correlação representativa entre a idade e o escore imuno‐histoquímico da pele de controles saudáveis de diferentes idades. O coeficiente de correlação foi 0,806; p=0,0002. Os dados foram analisados utilizando a correlação de Pearson. HCit, homocitrulina.

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A expressão do HCit em lesões de CS foi maior do que na pele de controles saudáveis pela análise imuno‐histoquímica.

A expressão de HCit em lesões de CS foi superior à da pele de controles saudáveis (Z=−3,703; p=0,0002; tabela 2, fig. 2A e B). A expressão de HCit nas lesões de pele dos pacientes com CS não foi correlacionada com a idade dos pacientes (coeficiente de correlação=0,165; p=0,499). A curva ROC da HCit previu o diagnóstico de CS; o valor da área sob a curva (AUC, area under the curve) foi 0,8520; o valor de corte foi 0,6119; o valor da sensibilidade foi 0,7368; e o valor da especificidade foi 0,8125 (fig. 2C).

Figura 2.

Níveis de expressão de HCit na pele de controles saudáveis e lesões de CS. Dez campos microscópicos de grande aumento (400×) foram selecionados aleatoriamente para observação em cada seção e o escore foi computado de acordo com a intensidade da coloração e a porcentagem de células positivas na epiderme que foi pontuada de 0 a 4 pontos: <5%, 0 pontos; 5%‐25%, 1 ponto; 25%‐50%, 2 pontos; 50%‐75%, 3 pontos; ≥ 75%, 4 pontos. A intensidade da coloração foi pontuada de 0 a 3 pontos: sem coloração 0 pontos, amarelo‐claro 1, amarelo‐acastanhado 2, castanho cor‐de‐chocolate, 3. Os pontos foram multiplicados para obter o escore final e, quanto maior o escore, mais forte era a expressão de HCit. Os dados medidos foram expressos como média±desvio padrão (χ±s). (A), Imagens representativas da análise de imuno‐histoquímica da pele de controles saudáveis e lesão de CS (A1, A3 representam imagens da imuno‐histoquímica da pele de controle saudável e lesão de CS aos 51 anos, respectivamente. A2, A4 representam imagens da imuno‐histoquímica da pele de controle saudável e lesão de CS aos 80 anos de idade, respectivamente). (B) Cada barra representa a média do escore da imuno‐histoquímica±D.P. e dados comparados entre dois grupos utilizando o teste t de Student (*** p <0,001). (C), Imagem representativa da curva ROC da HCit para o diagnóstico de CS. HCit, homocitrulina; CS, ceratose seborreica; Curva ROC, curva característica de operação do receptor.

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Não houve diferença significante na expressão do HCit entre a lesão de CS e a pele não afetada pela análise imuno‐histoquímica.

Como a tabela 2 e a figura 3 indicam, não houve diferença significante na expressão de HCit na lesão da pele e na pele não afetada dos pacientes com CS (t=−2,041; p=0,056). A expressão de HCit na pele não afetada não foi correlacionada com a idade dos pacientes (coeficiente de correlação=0,033; p=0,894).

Figura 3.

Expressão de HCit em lesão de CS e pele não afetada. O escore foi realizado de acordo com a intensidade da coloração e a porcentagem de células positivas na epiderme (método como mostrado na fig. 1). Os dados medidos foram expressos como média±desvio padrão (χ±s). Cada barra representa a média do escore da imuno‐histoquímica±D.P. Os dados foram analisados usando o teste t de Student (NS, sem diferença significante). HCit, homocitrulina; CS, ceratose seborreica.

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O nível sérico de CBL nos pacientes com CS foi maior do que em indivíduos saudáveis utilizando o método ELISA.

O nível sérico de CBL em indivíduos saudáveis foi correlacionado com a idade dos indivíduos (coeficiente de correlação=0,5763; p=0,0032; fig. 4A). O nível sérico de CBL em pacientes com CS também foi correlacionado com a idade dos indivíduos (coeficiente de correlação 0,682; p=0,004; fig. 4B). Em indivíduos saudáveis e pacientes com CS de faixa etária semelhante, o nível sérico de CBL foi de 1,61±0,33 e 1,85±0,29, respectivamente, com diferença estatisticamente significante entre os dois grupos (z=2,19; p=0,030; fig. 4C).

Figura 4.

Comparação do nível sérico de CBL em indivíduos saudáveis e em pacientes com CS por ELISA. Os sobrenadantes das amostras de soro de 16 indivíduos saudáveis, 16 pacientes com CS foram coletados para análise por ELISA. (A), Correlação representativa entre o nível sérico de CBL com a idade de indivíduos saudáveis; coeficiente de correlação 0,5763; p=0,0032. Os dados foram analisados utilizando a correlação de Pearson. (B), Correlação representativa entre o nível sérico de CBL com a idade dos pacientes com CS; coeficiente de correlação 0,682; p=0,004. Os dados foram analisados utilizando a correlação de Pearson. (C), Cada barra representa a média do nível sérico de CBL±D.P. em indivíduos saudáveis e pacientes com CS. Os dados foram analisados usando testes U (*p <0,05). CBL, carbamilação da proteína lisina; CS, ceratose seborreica; ELISA, ensaio imunossorvente ligado à enzima.

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O envelhecimento da pele é processo complexo e de evolução longa, que progride gradualmente com a idade. Embora o envelhecimento da pele tenha muitas manifestações, não há índice objetivo para medi‐lo até o momento. No presente estudo, os autores descobriram que os níveis de HCit (CBL) na pele e no soro de indivíduos saudáveis de diferentes idades estavam positivamente correlacionados com a idade dos indivíduos. Além disso, a expressão da HCit em pacientes com CS foi maior do que em indivíduos saudáveis. O nível de CBL no soro dos pacientes com CS foi maior do que em indivíduos saudáveis. A HCit pode ser usada para predizer o diagnóstico de CS, o que implica que a HCit pode ser um dos potenciais biomarcadores do envelhecimento da pele.

A reação de carbamilação é processo no qual uma molécula de cianato e seu isômero estrutural, o isocianato, combinam‐se com grupos funcionais livres de proteínas, polipeptídios ou aminoácidos livres.6 Essa reação geralmente ocorre com os grupos lisina ɛ‐amino, formando N(6)‐carbamoil‐L‐lisina (CBL). O nome comum para esse composto é homocitrulina (HCit), o produto mais característico da reação de carbamilação.7 Estudos anteriores relataram que a reação de carbamilação da proteína ocorre em pacientes com doenças crônicas, como doença renal crônica, aterosclerose e artrite reumatoide,8–10 mas apenas poucos estudos abordaram a relação entre a reação de carbamilação da proteína e o envelhecimento da pele. Gorisse et al.11 descobriram que o nível de HCit em extratos de pele total aumentou significantemente com a idade dos indivíduos. Além disso, o nível do colágeno tipo 1 também aumentou significantemente com a idade dos indivíduos. A pele analisada de seres humanos, bovinos e ratos.

Caracedo et al.12 analisaram proteínas carbamiladas no sangue de indivíduos saudáveis. Eles descobriram que os níveis de proteína carbamilada no sangue estavam correlacionados com a idade dos indivíduos; portanto, quanto mais avançada a idade dos indivíduos, maior era o nível de HCit. Os resultados do presente estudo são semelhantes aos dos estudos anteriores, que indicam que a HCit está correlacionado à idade e ao envelhecimento. Na reação de carbamilação de proteínas, as propriedades estruturais e funcionais das proteínas e sua interação com as células são alteradas, levando ao envelhecimento molecular da proteína.17 As moléculas de colágeno e elastina na pele têm longo período de meia‐vida e contêm mais lisina e hidroxilisina, que são os alvos preferidos para a reação de carbamilação.18 Estudos anteriores relataram que, após a reação da carbamilação, a estrutura da hélice terciária das proteínas do colágeno tipo I mudou ligeiramente. Isso prejudica a capacidade do colágeno tipo 1 de se transformar em fibras normais e também diminui sua estabilidade térmica, o que leva a alterações na matriz extracelular. Todos esses eventos interferem com a homeostase dos tecidos. Além disso, a proteína de colágeno também desempenha papel fundamental na estruturação do tecido conjuntivo, participando do evento‐chave do mecanismo de defesa do hospedeiro – a ativação dos glóbulos brancos. No entanto, o colágeno carbamilado perde a capacidade de estimular a oxidação dos neutrófilos pela via de sinalização da integrina LFA‐1 e da quinase de adesão focal (p125FAK), que se sabe estar envolvida no desenvolvimento de inflamação e infecção.19,20 Portanto, a reação de carbamilação de proteínas causa alterações próprias do envelhecimento da pele, como flacidez, rugas e inflamação.

Muitos estudos mostraram que a CS é manifestação local do envelhecimento da pele.13,16 Além de determinar a diferença na expressão da HCit entre indivíduos saudáveis de diferentes idades, foram selecionados pacientes com CS como participantes do estudo. Os autores descobriram que a expressão da HCit nas lesões de pele CS era maior do que na pele de controles saudáveis, e o nível de CBL no soro dos pacientes com CS era maior do que o de indivíduos saudáveis. Os autores também observaram que a HCit poderia predizer o diagnóstico de CS, o que demonstrou ainda mais a correlação entre a HCit e o envelhecimento da pele. As principais limitações do presente estudo são o pequeno tamanho da amostra sérica, necessitando que o tamanho da amostra seja ampliado em estudos futuros.

A CS é lesão comum na dermatologia. Sua incidência aumenta com a idade,4 e é manifestação do envelhecimento da pele. O alto nível de expressão de HCit está correlacionado com a CS e o envelhecimento da pele, e a HCit pode ser um dos potenciais biomarcadores de CS e envelhecimento da pele.

O presente estudo recebeu suporte financeiro da Wu JiePing Clinical Medicine Foundation (320.6750.19089‐31) e dos principais projetos da Natural Science Foundation of the Jiangsu Higher Education Institutions of China (Concessão no 18KJA320014).

Juping Chen: Aprovação da versão final do manuscrito; revisão crítica da literatura; participação intelectual em conduta propedêutica e/ou terapêutica de casos estudados; revisão crítica do manuscrito; elaboração e redação do manuscrito; concepção e planejamento do estudo.

Jun Liu: Obtenção, análise e interpretação dos dados; elaboração e redação do manuscrito; análise estatística.

Zheng Wang: Participação efetiva na orientação da pesquisa.

Jiandan Xu: Participação efetiva na orientação da pesquisa.

Jia Tao: Participação efetiva na orientação da pesquisa.

Hualing Li: Aprovação da versão final do manuscrito; participação intelectual em conduta propedêutica e/ou terapêutica de casos estudados; revisão crítica do manuscrito; concepção e planejamento do estudo.

Nenhum.